肿瘤相关抗原的研究已成为免疫治疗的热门靶点，但其在临床前/临床阶段进展缓慢。在此，文章开发了一系列MAGE-A1限制性抗原肽，这些肽对特定乳腺癌表现出显著的抑制作用。通过Fmoc固相法合成肽，并通过在线服务器进行分析。通过倒置荧光和流式细胞术定性和定量评估其与HLA-A2的稳定性和亲和力。通过形态学和表面标志物观察其对树突状细胞（DCs）成熟的体外作用。通过将负载合成肽的DCs与CD8⁺T淋巴细胞共孵育，检测上清液中IFN-γ的分泌。评估了对4种细胞系的特异性免疫反应，并进一步评估了MCF-7异种移植BALB/c裸鼠模型中的反应。大多数衍生肽，尤其是I-6，表现出很强的HLA-A2结合能力。与细胞因子相比，I-6显著诱导DCs成熟并促进CD8⁺T淋巴细胞活化。此外，与其它肽相比，它对MAGE和HLA-A2双阳性细胞的杀伤作用更具特异性。文章成功开发出了对HLA-A2具有高亲和力的I-6，它能够诱导强烈的特异性免疫反应。这可能是乳腺癌免疫治疗的一个潜在候选药物，值得进一步研究。

化合物I-6诱导树突状细胞成熟，化合物I-6促进γ干扰素（IFN-γ）释放，化合物I-6通过激活CD8⁺T淋巴细胞在体外对MDA-MB-231细胞表现出显著的细胞毒性作用

名称：化合物 I-6 

单字母 H2N-SQYGEPRKL-OH

多字母 H2N-Ser-Gln-Tyr-Gly-Glu-Pro-Arg-Lys-Leu-OH

氨基酸个数 9

分子式 C47H76N14O15

平均分子量(MW) 1077.19

通过评估化合物的活性，文章发现所有化合物均无细胞毒性，且大多数化合物的HLA-A2亲和力优于先导化合物，其中化合物I-6（SQYGEPRKL）的亲和力最强，这与其空间结构密切相关。它几乎占据了HLA-A2分子的所有结合口袋。此外，由I-6诱导的细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）分泌IFN-γ的细胞数量显著高于其他细胞。细胞毒性试验表明，其对人乳腺癌细胞的特异性杀伤作用明显强于其他肽。同时，对人乳腺癌细胞系MCF-7（MAGE-1þ）的杀伤效果显著高于人乳腺癌细胞系MDA-MB-231(MAGE-1-)。这些结果为通过激活CTLs对肿瘤的特异性杀伤作用来设计和进行肿瘤相关抗原多肽疫苗的免疫治疗奠定了基础。

总体而言，本研究为如何通过增强抗原肽与呈递分子之间的亲和力来提高抗肿瘤活性提供了一种新方法。然而，文章的方法存在一些局限性。首先，癌细胞的基因突变频率略高于正常细胞，这可能导致所表达的肿瘤抗原发生突变。尽管在文章的研究中未出现这种情况，但在临床实践中仍不能排除这种可能性，今后应加强对此方面的考虑。其次，肿瘤微环境复杂，主要组织相容性复合体 I 类（MHC-I）分子的表达可能会降低，从而阻碍 T 淋巴细胞的活化，最终帮助肿瘤存活。癌症免疫治疗领域的主要挑战在于复杂的免疫抑制机制，这需要进一步研究。

参考文献：doi.org/10.1016/j.ejmech.2020.112051