Met-12是一种Fas受体的小肽抑制剂。Met-12能抑制Fas受体介导的光感受器细胞凋亡(apoptosis)，减少Caspase激活。Met-12可用于光感受器保护剂的研究。

661W细胞系是一种通过SV40-T抗原表达实现永生化的光感受器细胞系，其表达受人类视网膜色素结合蛋白启动子调控。该细胞系能够表达包括蓝锥和绿锥色素、转导素及锥形视蛋白在内的视锥细胞标记物，并能通过半胱天冬酶介导的程序性死亡机制。

单字母 H2N-HHIYLGAVNYIY-OH
多字母 H2N-His-His-Ile-Tyr-Leu-Gly-Ala-Val-Asn-Tyr-Ile-Tyr-OH
氨基酸个数 12
分子式 C71H99N17O17
平均分子量(MW) 1462.65

甲硫氨酸（Met）可作为新型Fas信号通路抑制剂。研究发现，一种由12个氨基酸组成的短肽Met12（包含Fas结合基序YLGA周围的氨基酸）能够保护Jurkat细胞免受Fas配体诱导的凋亡。为验证该肽是否也能阻断光感受器中的Fas死亡受体信号通路，在661W细胞中同时使用Fas抗体和Met12或失活突变肽mMet（其中包含YLGA基序的六个中心氨基酸被随机替换）进行处理。通过检测处理48小时后的Caspase 8活性，发现Met12能以剂量依赖性方式抑制Fas抗体诱导的Caspase 8活化。而单独使用mMet肽或溶剂处理细胞时，对Fas介导的Caspase 8激活无显著影响。这些结果表明：661W细胞具有完整的Fas死亡受体信号通路，且Met12肽可在体外光感受器模型中有效抑制Fas信号传导。

研究目的：验证Fas受体小肽抑制剂Met12对视网膜脱离后外源性与内源性凋亡通路激活的影响。

研究方法：通过向褐挪威大鼠视网膜下腔注射1%透明质酸形成视网膜-视网膜色素上皮分离模型。在分离时，将源自致癌蛋白Met胞外结构域的Fas结合肽Met12注入视网膜下腔。采用相同方式给予突变肽和溶媒作为无效对照。使用Fas激活抗体在含或不含Met12的条件下诱导661W细胞外源性凋亡通路。通过比色法和发光法测定视网膜提取物及细胞裂解液中Caspase 3、Caspase 8和Caspase 9活性。分离后第3天进行视网膜切片末端脱氧核苷酸转移酶dUTP缺口末端标记（TUNEL）检测。视网膜脱离2个月后进行组织学分析。

研究结果：Met12可抑制Fas诱导的661W细胞Caspase 8活化。类似地，视网膜下腔注射Met12可抑制视网膜脱离后Caspase 3、Caspase 8和Caspase 9的活化。这对应于接受Met12治疗动物视网膜-视网膜色素上皮分离后光感受器TUNEL阳性染色水平降低，而无效突变肽处理组未见此现象。经过两个月的观察，接受视网膜下Met12治疗的动物，其外核层显著增厚，感光细胞数量也明显增多。

研究结论：小分子肽Met12可能在视网膜与色素上皮层分离的情况下，起到保护感光细胞的作用。

参考文献：DOI: 10.1167/iovs.09-4439