BAM(8-22) 具有镇痛作用，还可抑制小胶质细胞的活化

中文名称: BAM(8-22)、Bovine Adrenal Medulla Peptide (8-22)
英文名: BAM(8-22)、Bovine Adrenal Medulla Peptide (8-22)
CAS号: 412961-36-5
单字母: H2N-VGRPEWWMDYQKRYG-OH
三字母: H2N-Val-Gly-Arg-Pro-Glu-Trp-Trp-Met-Asp-Tyr-Gln-Lys-Arg-Tyr-Gly-OH
氨基酸个数: 15

BAM(8-22) 是前脑啡肽 A 的蛋白水解切割产物和感觉神经元特异性受体 (SNSR) 的激动剂，也是 Mas 相关的 G 蛋白偶联受体 (Mrgprs)，MrgprC11 和 hMrgprX1 的有效激活剂，并以 Mrgpr 依赖性方式诱导小鼠抓挠。此外，BAM(8-22) 具有镇痛作用，还可抑制小胶质细胞的活化

体外研究

BAM(8-22) (0.1-10 nM) 可在 LPS (HY-D1056) 处理的 BV-2 细胞中增加 miR-184 水平，降低 Iba-1 和炎性细胞因子的表达。

体内研究

BAM(8-22) (皮内注射; 50 μL; 1 mM; 单剂量) 可使野生型小鼠出现强烈的抓挠行为，但 Mrgpr-clusterΔ−/− 突变小鼠的抓挠行为明显减少。

BAM(8-22) (鞘内注射; 10 μL; 3-30 nmol; 单剂量) 在大鼠疼痛模型中具有改善作用。

研究背景

骨癌疼痛（BCP）是癌症患者最常见的疼痛类型，期间小胶质细胞被激活。既往研究表明，BAM8-22可通过抑制小胶质细胞活化缓解 BCP ，但其机制尚不明确。

研究目的

探讨BAM8-22抑制小胶质细胞活化的具体机制。

研究方法

本研究主要在 BCP 小鼠或脂多糖（LPS）处理的小胶质细胞BV-2细胞中进行。小鼠行为学测试在BAM8-22处理后0、1、2、12和24小时进行。通过定量RT-PCR检测miR-184和CX3CR1 mRNA的表达。通过蛋白质印迹分析检测CX3CR1蛋白及小胶质细胞活化标志物Iba-1的表达。通过 ELISA 检测 TNF - α 和IL- 1β 水平。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-184与CX3CR1的结合。

研究结果

BAM8-22处理后， BCP 小鼠和LPS处理的BV-2细胞中均观察到miR-184水平升高，同时Iba-1和炎症细胞因子表达下调，即小胶质细胞活化受到抑制。miR-184的抑制逆转了BAM8-22对小胶质细胞活化的抑制作用。进一步的体外研究表明，miR-184与CX3CR1的3′ UTR 结合，并通过抑制CX3CR1表达来抑制小胶质细胞活化。此外，抑制CX3CR1表达可消除miR-184抑制剂对BAM8-22诱导的小胶质细胞活化逆转作用，并降低Iba-1表达及促炎细胞因子分泌。

研究结论

在 BCP 模型中，BAM8-22上调miR-184表达，升高的miR-184与CX3CR1的3′ UTR 结合并抑制其表达，从而抑制小胶质细胞活化，提示miR-184/CX3CR1可能用于 BCP 治疗。

参考文献：DOI: 10.1007/s12031-019-01455-0