今天分享，由李进典教授团队主导、Zerong Wang博士为第一作者的最新研究《68Ga标记CSPG4靶向肽在胰腺癌与胃癌PET/CT成像中的临床前评估》已发表于权威期刊，《Medicinal Chemistry》。该研究聚焦肿瘤特异性分子探针开发，为精准诊疗提供新思路。  

图4. MicroPET/CT成像与蛋白质印迹分析结果。[68Ga]Ga- DOTA -LS10(a)、[68Ga]Ga- DOTA -SH11(b)及[68Ga]Ga- DOTA -TH10(c)在MKN45和ASPC1荷瘤小鼠体内的MicroPET/CT图像；(d)ASPC1、ASPC1阻断剂及HepG2细胞在60分钟时的MicroPET/CT图像；(e)不同器官的感兴趣区域分析结果（n=3：ASPC1 vs ASPC1阻断剂，**P=0.001881；ASPC1 vs HepG2，***P=0.000369）；(f)各实验组肿瘤与肌肉组织比值（n=3）；(g)[68Ga]GaDOTA-TH10与[18F] FDG 的头对头对比MicroPET/CT图像；(h)60分钟时[68Ga]Ga- DOTA -TH10与[18F] FDG 的肿瘤与肌肉组织比值（n=3）；(i)通过蛋白质印迹法评估CSPG4表达情况。

通过微PET/CT成像技术，在MKN45和ASPC1两种异种移植模型中对三种探针的肿瘤靶向效能进行了比较评估。图像显示，[68Ga]Ga- DOTA -SH11（图4b）和[68Ga]GaDOTA-TH10（图4c）在所有时间点（30/60/90分钟）均在肿瘤部位持续呈现局灶性放射性聚集；而[68Ga]GaDOTA-LS10（图4a）的显像效果较差。基于上述稳定性评估结果，最终选择[68Ga]Ga- DOTA -TH10用于后续实验。

为进一步评估[68Ga]Ga-DOTA-TH10的显像效果，作者在携带ASPC1肿瘤的小鼠和携带HepG2肿瘤的小鼠（这两种肿瘤细胞系的CSPG4表达水平相对较低）上进行了头对头阻断显像实验（图4d）。90分钟时，[68Ga]Ga-DOTA-TH10的肿瘤摄取率为2.07 ± 0.25%ID/g at 30 min，1.63 ± 0.15% ID/g at 60 min，and 1.43 ± 0.12%ID/g（图4e）。在阻断组中，ASPC1肿瘤的[68Ga]Ga-DOTA-TH10摄取率在60分钟时为0.88±0.09%ID/g，而HepG2肿瘤的摄取率为0.60±0.05%ID/g，均显著低于ASPC1实验组（ASPC1 vs ASPC1阻断组，P=0.001881；ASPC1 vs HepG2组，P=0.000369）。60分钟被确定为最佳显像时间点，此时[68Ga]Ga- DOTA -TH10的肿瘤/肌肉比值（T/M）达到最高值：阻断组为2.90 ± 0.36 at 30 min，3.62 ± 0.52 at 60 min，while it was 2.59 ± 0.47，HepG2组为2.00±0.05。

在携带ASPC1肿瘤的小鼠模型中，对[68Ga]Ga-DOTATH10与[18F] FDG 进行了直接对比；微PET/CT图像如图4g所示。尽管[18F] FDG 的T/M值为7.60±0.27（图4h），高于TH10的数值（4.83±0.88），但其成像效果受健康器官的影响更为显著。

蛋白质印迹实验证实，CSPG4在ASPC1和MKN45细胞中高表达，而在HepG2细胞中表达水平较低。这一结果与微正电子发射断层扫描/计算机断层扫描（microPET/CT）图像显示的肿瘤摄取情况一致，进一步验证了[68Ga]GaDOTA-TH10的靶向能力。

2.免疫组织化学：生物分布与生物安全性

图5. 免疫组织化学、生物分布及生物安全性研究。（a–c）ASPC1、MKN45和HepG2细胞的免疫组织化学结果。(d)ASPC1荷瘤小鼠的生物分布（n=3,60分钟组与60分钟对照组比较，*P=0.019379）。(e)正常小鼠与注射[68Ga]GaDOTA-TH10小鼠的血液生化指标。(f)正常小鼠与注射[68Ga]Ga- DOTA -TH10小鼠的红细胞（RBC）、白细胞（WBC）及 PLT 计数。(g)正常小鼠与注射[68Ga]Ga- DOTA -TH10小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏及肾脏的H&E染色代表性图像。

图5a−c展示了经CSPG4免疫组织化学染色的ASPC1、MKN45和HepG2肿瘤组织切片。与HepG2相比，ASPC1和MKN45中CSPG4的表达更为显著，这与微PET/CT成像显示的肿瘤摄取结果一致，进一步证实了[68Ga]Ga- DOTA -TH10具有优异的靶向能力。

生物分布结果如图5d和图S7所示。结果显示：90分钟时ASPC1肿瘤的摄取量为1.74 ± 0.12 at 30 min，1.38 ± 0.16 at 60 min，and 0.85 ± 0.10；与未阻断组相比，60分钟阻断组的摄取量显著降低至0.9±0.15（降幅达34.8%，P=0.019）。除肾脏外，健康器官对[68Ga]Ga- DOTA -TH10的摄取量普遍低于肿瘤组织。

血液学及组织病理学评估表明[68Ga]Ga- DOTA -TH10具有良好的生物安全性特征。两组动物的血清生化指标（包括肝肾功能标志物及代谢指标）均处于相近水平，提示未出现全身毒性反应（图5e）。同时，常规全血细胞计数（CBC）分析显示，[68Ga]GaDOTA-TH10治疗组与对照组动物的红细胞（RBC）、白细胞（WBC）及血小板（PLT）参数均无统计学显著差异（图5f）。通过苏木精-伊红（H&E）染色进行的组织学评估进一步证实了这些结果：注射放射性示踪剂的小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏及肾脏结构均保持完整的细胞形态和组织完整性，与对照组相比未见炎症、坏死或退行性病变迹象（图5g）。

综上所述，这些数据充分证明[68Ga]Ga- DOTA -TH10具备适用于体内应用的生物相容性。